本试剂盒革新了传统质粒纯化流程,利用独家授权专利:三相分离技术(专利号 申请号:2 02511959521.4),在中和步骤同步、精准地去除蛋白质、基因组DNA及内毒素三大类杂 质,一步实现深度净化!从此告别内毒素困扰,确保每一份质粒DNA都是“去内毒素污染” 的纯净产物,专为最严苛的下游应用而生。
| 目录号 | 规格 | 价格 | 备注 |
|---|---|---|---|
EX101-10 | 10 rxn | 1300 |
LockTox™ 超纯级无内毒素质粒小提提取试剂盒是分子生物学实验室的基础性工具,其核心目的是从100~400mL细菌(主要是大肠杆菌)培养物中快速、高效地分离并纯化质粒 DNA,为下游实验提供高质量的遗传物质模板。例如:哺乳动物/昆虫细胞转染、体内实验 (如动物注射)和病毒载体生产等。
◆ 革命性解决内毒素难题:三相分层固相锁油,从分子和液体去除内毒素污染
◆ 数据结果稳定,260/280比值的中位数在1.86左右
◆ 专利技术兜底基因组DNA,质粒DNA稳定性,用力混匀不断裂。
◆ 高得率与广泛兼容性:优化结合体系确保从低到高拷贝数质粒的稳定高回收率
◆ 稳定的油相分层:室温孵育,短暂离心,水、固、油相直接分层,不起油花
◆ 不需要现加RNA酶,高效去除RNA
本产品所有试剂适宜于室温15℃~30℃避光运输和保存,保存期15个月。L3适合4℃长期储存。
【核心创新突破】全新材质高耐受结合滤片
● 高速超长离心物理耐受测试:在 8,000 ×g 超高速下连续离心 2 小时 ,吸附柱滤片完好如初,不皱缩、不翘边。
● 超大容量结合载量与极高回收:针对 400 mL 高密度大肠杆菌过夜培养物,单柱稳定高效回收 3.0 mg 超高纯度质粒 DNA。
● 级联纯化品质控制:彻底去除宿主 RNA、基因组 DNA 污染及内毒素,提取产物中超螺旋单体构象占比高达 >90%。
| 基础验证项目 | 测试条件/方法 | 测试结果/数据 | 质量控制标准 |
|---|---|---|---|
| 滤片离心物理耐受 | 8,000 ×g 超高速离心 2 h | 滤片平整无皱缩、无翘边 | 物理机械结构零损坏 |
| 内毒素清除效率 | 鲎试剂显色基质法 | 内毒素残量低于检测限 | 达到细胞转染标准 (<0.1 EU/μg) |
| 超螺旋比例分析 | 1% 琼脂糖凝胶电泳 | 超螺旋单体构象占比高达 95.8% | 满足高效率细胞转染要求 (≥90%) |
| RNA和宿主gDNA | 电泳检测 | 宿主 gDNA 未检出,RNA 未检出 | 无显性核酸污染物杂带 |
测试条件:提取后的质粒,取样本以脂质体转染法,转染 SW480 细胞(对内毒素敏感度高),孵育 48 小时后荧光显微镜观察。
| 编号 | 插入质粒 | 菌种 | 菌液量 | 转染测试细胞 |
|---|---|---|---|---|
| A | pEGFP-N3 | DH5α | 200 mL | SW480 细胞系 |
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● SW480 细胞转染后呈现高密度的亮绿色荧光表达,反映提取的质粒具备优秀的生物学活性与高转录翻译效率。
● 质粒样品极度安全无毒,SW480 敏感细胞系贴壁生长良好、形态舒展,未见任何细胞皱缩或脱落。
● 转染效率达到 >80%,完全满足敏感细胞系转染、蛋白表达及基因功能研究的高标准要求。
测试条件:200mL 过夜培养菌液,按标准流程提取,产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
| 编号 | 插入质粒 | 菌种 | 菌液量 |
|---|---|---|---|
| A | pEGFP-N3 | DH5α | 200 mL |
| B | pEGFP-N3 | DH5α | 200 mL |
| C | pEGFP-N3 | DH5α | 200 mL |
| D | pEGFP-N3 | DH5α | 200 mL |
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● 电泳结果显示质粒 DNA 迁移条带集中、清晰明亮,无拖尾或弥散现象。
● 质粒构象完好,超螺旋单体构象占比高达 >95%,具备优异的空间分子构象完整性。
● 基因组 DNA 彻底去除,未观察到大分子宿主 gDNA 滞留条带。